Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии (Санкт-Петербург). Итоги научно-исследовательской деятельности за 2010 год №1(51), 2011 год

За прошедшие годы решён ряд фундаментальных и прикладных задач. Установлена биологическая гетерогенность острых миелоидных лейкозов (ОМЛ) в рамках однотипных морфологических и цитогенетических вариантов и определены показания и сроки выполнения аутологичной и аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток. Разработан алгоритм генетической диагностики лимфопролиферативных заболеваний, который включает кариотипирование клеток костного мозга, периферической крови и FISH исследование. Его использование позволяет существенно повысить обнаружение высокоспецифичных генетических маркеров, играющих важную роль в диагностике и прогнозе указанных заболеваний.

Убедительно показано, что возраст — один из принципиальных факторов прогноза при ОМЛ множественной миеломе (ММ), неходжкинских лимфомах (НХЛ). Важным маркером риска является кариотип. Так, выживаемость больных ОМЛ с несбалансированными и множественными хромосомными повреждениями ниже, чем выживаемость больных с такими аберрациями, как t (8;21), t (15;17), inv 16. В проведённых исследованиях продемонстрировано достоверное снижение общей и бессобытийной выживаемости больных ОМЛ с мутационным статусом FLT3-ITD+/NPM1-/. Показана целесообразность включения больных ОМЛ с нормальным кариотипом и экспрессией FLT3 ITD в группу высокого риска.

Выявлены особенности течения ММ у лиц пожилого и старческого возраста. Обнаружена высокая частота встречаемости ММ в III ст. с хронической почечной недостаточностью (ХПН). Факторами, негативно влияющими на общую выживаемость пожилых больных, в первую очередь являются: гемоглобин < 80 г/л, креатинин > 120 мкмл/л, плазмоклеточная инфильтрация костного мозга > 30%, выраженный деструктивный процесс в костях таза или в трубчатых костях, с возникновением спонтанных переломов костей, компрессия спинного мозга.

Впервые установлены особенности апоптотической активности опухолевых клеток костного мозга больных ММ. Эффективность апоптоза клеток опухолевого клона, индуцированного специфической терапией, зависит от исходной апоптотической активности клеток.

Разработаны новые подходы к лечению больных ХЛЛ с высоким цитогенетическим риском и пожилых пациентов с ММ. Новым стандартом лечения пожилых пациентов с ММ признана схема VMP (бортезомиб + мелфалан + преднизолон), а больных ХЛЛ — анти-CD52 моноклональные антитела. Предложен новый алгоритм лечения анемического синдрома у больных лимфопролиферативными заболеваниями с использованием препаратов рекомбинантного эритропоэтина.

Проводилась работа по совершенствованию диагностики вирусных инфекционных осложнений у онкогематологических больных за счёт использования олигонуклеотидных биочипов. Осуществлён дизайн биочипа и подобраны праймеры для оценки активности цитомегаловирусной инфекции в мультиплексной ПЦР по экспрессии отдельных генов.

Эпидемиологические исследования, проведённые сотрудниками института, свидетельствуют о высокой частоте встречаемости различных форм тромбофилии. Установлена важная роль антифосфолипидного синдрома, гипергомоцистеинемии и полиморфизма генов фолатного и метионинового циклов в патогенезе артериальных и венозных тромбозов. Разработана и апробирована технология проведения генетического тестирования больных гемофилией с целью выявления молекулярно-генетических маркеров возникновения ингибиторных форм заболевания.

Были изучены особенности иммунного ответа у больных при гемокомпонентной терапии. В результате определены группы риска развития высокой степени сенсибилизации: женщины, пациенты с наличием в генотипе специфичностей А25 и DRB1Ч03, или гаплотипа A1, B8, DRB1Ч03. Показано, что пациентам групп риска следует назначать гемокомпонентную терапию только по жизненным показаниям, использовать лейкофильтрованные гемокомпоненты и подбирать доноров, совместимых по HLA-антигенам, особенно при трансфузии концентрата тромбоцитов.

В отчётные годы разработана оптимальная технология лейкофильтрации плазмы с помощью нового устройства «Лейкосеп-Пл», обеспечивающая высокую степень лейкодеплеции плазмы. Использовали устройство Лейкосеп и лейкофильтры Imugard III RC японской фирмы Terumo. Лейкофильтрация не оказывала отрицательного действия на морфологию и функциональные свойства эритроцитов. Доказана морфо-функциональная полноценность и пригодность к трансфузиям размороженных и отмытых лейкофильтрованных эритроцитов, в том числе карантинизированных, со сроком хранения 6 и 7 мес при —38…±2 °С (максимальный срок хранения 9 мес).

Помимо работ, посвящённых изучению иммунологических конфликтов при трансфузионной терапии, в институте проводилась работа по обеспечению вирусной безопасности донорской плазмы крови при обязательном сохранении количества и активности всех её биологических составляющих. Разработан и апробирован лабораторный метод фотодинамической инактивации вирусов в плазме донорской крови. Он основан на комбинированном воздействии видимой части спектра на плазму, в которую вводят фуллерен в виде комплекса SiO2– C60. Исследования показали, что условия фотодинамического воздействия на плазму крови с использованием твердофазного фотосенсибилизатора практически не оказывают влияния на свёртывающую систему крови, а обработанная плазма крови не обладает свойством цитотоксичности. Предлагаемый метод не имеет аналогов, а результаты работы являются основой для создания аппаратуры по инактивации плазмы донорской крови.

В исследованиях, посвящённых организации специализированной гематологической помощи, был проведён анализ заболеваемости населения Санкт-Петербурга злокачественными новообразованиями лимфатической и кроветворной ткани. Заболеваемость злокачественными новообразованиями кроветворной и лимфатической ткани в Санкт-Петербурге в 1,5 раза выше, чем по России, и на 23% больше, чем в Москве. Высокие уровни заболеваемости в Санкт-Петербурге объясняются рядом причин: увеличение доли лиц пожилого и старческого возраста в структуре населения города, экологическое и социально-экономическое неблагополучие значительной части населения, способствующее снижению иммунной защиты в популяции, климатические условия, усугубляющие воздействие экологических факторов и фактора снижения иммунной защиты населения. В то же время летальность от лейкозов, наоборот, стала ниже, что свидетельствует об эффективности современных высокотехнологичных методов лечения.

Для решения организационных вопросов службы крови в отчётные годы проведён анализ её деятельности в различных регионах РФ. Стабилизировалось число учреждений и подразделений службы крови, улучшилось руководство деятельностью данных объектов в регионе со стороны базовых станций переливания крови, отмечено увеличение числа доноров, в том числе иммунных и первичных, числа кроводач и плазмодач. Общее количество доноров в России в 2009 году составило 1908 350, из них безвозмездных 91,1%. Положительными моментами являются: рост объёма средней разовой дозы крови, полученной от безвозмездного донора, увеличение числа доноров плазмы и объёма плазмы, полученной методом плазмафереза, иммунной плазмы и доноров клеток крови.

Внедрение новых технологий (карантинизации плазмы, лейкофильтрации, вирусинактивации) позволило повысить уровень инфекционной безопасности гемотрансфузий.

С целью внедрения разработанных в институте препаратов (Полиоксифумарин, Конфумин, Липоферол) продолжалась активная работа по подготовке и представлению к утверждению нормативно-технической документации различного уровня на проведение очередных этапов разработок препаратов. Проведено клиническое изучение полиоксифумарина. Полиоксифумарин в дозе 10–20 мл/кг обладает гемодинамическим действием, сопоставимым с действием зарубежных аналогов (гелофузин и инфукол).

Проведено открытое многоцентровое исследование по оценке эффективности конфумина. Выяснилось, что препарат обладает антигипоксическим действием и оказывает корригирующее действие на кислотно-основное состояние организма, вызывает мобилизацию эндогенной жидкости с увеличением внутрисосудистого объёма, что обеспечивает волемический эффект препарата. По результатам клинических наблюдений в проект инструкции по медицинскому применению внесены изменения, касающиеся доз и схем введения конфумина.

Выполнена работа по отработке метода качественного и количественного определения фракционного состава субстанции «Фосфолипиды кислые соевые» препарата Липоферол методом тонкослойной хроматографии. Составлена, согласована и утверждена необходимая нормативно-техническая документация на набор реагентов АПТВ-контроль, проведены требуемые испытания.

Важным компонентом лечения онкологических больных в послеоперационном периоде является патогенетически направленная инфузионно-трансфузионная терапия, которая должна включать солевые и плазмозамещающие растворы гемодинамического действия, растворы аминокислот, глюкозы, жировых эмульсий. Исследования, проведённые сотрудниками института, показали, что базовыми растворами для проведения послеоперационной инфузионной терапии больных раком пищевода и кардии являются препараты, обладающие антигипоксантным действием — мафусол и полиоксифумарин. Применение фумаратсодержащих растворов способствует адаптации организма к гипоксии, быстрому устранению явлений метаболического ацидоза, нормализации показателей рН и бикарбонатов крови.

Выявлена обратная зависимость между объёмом инфузии антигипоксантов и уровнем калия крови: чем больше объём инфузии, тем менее выражены изменения калия крови.

По мнению исследователей, максимальным объёмом инфузии антигипоксантов, достаточным для нормализации показателей калия крови в послеоперационном периоде, можно считать 1200 мл/сутки.

В отчётные годы продолжалось изучение физико-химических свойств различных серий эмульсий на основе перфторуглеродов (ПФУ) и фосфолипидов. В серии модельных экспериментов доказана морфофункциональная сохранность эритроцитов и нейтрофильных гранулоцитов при инкубации крови с эмульсиями, предварительно разведёнными кровезаменителями. Полученные данные расширяют современные представления о механизмах воздействия эмульсий ПФУ на кровь и свидетельствуют о перспективности дальнейших исследований влияния эмульсий на морфофункциональную активность форменных элементов крови.

Продолжались экспериментальные исследования по поиску методов повышения эффективности кровезаменителей при геморрагическом шоке путём оптимизации состояния сосудистого тонуса регуляторами синтеза оксида азота. Впервые изучено влияние донора оксида азота — динитрозольного комплекса железа с глютатионом (ДНКЖ) на кровообращение, газовый состав и кислотно-основное состояние крови здоровых животных. Выявлено, что ДНКЖ наряду с гипотензивным действием усиливает сократительную способность сердечной мышцы и не изменяет газовый состав и кислотно-основное состояние крови. Эти данные являются базисными для продолжения научных исследований, результаты которых могут быть использованы для применения L-аргинина в пред­операционном периоде и при инфузионной терапии геморрагического шока.

За отчётный период утверждено и опубликовано 6 медицинских технологий, Порядок проведения иммуногематологических исследований у беременных, рожениц, плодов и новорождённых (Мет. письмо); поданы 2 заявки на изобретение «Способ стимуляции кишечной перистальтики»; «Способ регионарной инфузионной химиотерапии метастазов печени печёночной недостаточности».

Освоена технология генотипирования полиморфизма Т-31C в гене интерлейкина-1-бета методом ПЦР-ПДРФ и ДНК-типирование антигенов тромбоцитов в реальном времени.

Разработана и введена в действие новая статистическая форма представления результатов деятельности ЛПУ по вопросам трансфузиологии, соответствующая объёму и уровню решаемых задач по оказанию эффективной трансфузиологической помощи.

Разработана и внедрена технология типирования антигенов эритроцитов доноров и реципиентов и изготовления тест-эритроцитов для определения антител к антигенам эритроцитов.

Успешно защищены 5 кандидатских и 4 докторские диссертации. В течение 2006–2010 гг. сотрудниками института опубликовано в отечественных и зарубежных журналах 432 работы, в том числе 12 монографий. За прошедшие годы проведено 35 циклов обучения врачей, организовано и проведено 11 научно-практических конференций. Сотрудники института принимали участие в работе 162 российских и международных конгрессов и научно-практических конференций и 40 рабочих совещаний и семинарах, проводимых в России и за рубежом, посвящённых различным вопросам гематологии, трансфузиологии, достижениям в сфере инновационных разработок, здоровью нации.